西瓜鸟氨酸氨甲酰转移酶基因克隆及原核表达
Molecular Plant Breeding(2017)
Abstract
从西瓜叶片中克隆瓜氨酸合成途径的关键酶鸟氨酸氨甲酰转移酶(OCT)基因.OCT基因由1 137个碱基组成,编码378个氨基酸,蛋白分子量约为41.8 kD,等电点为8.61.氨基酸序列比对分析表明,西瓜OCT与香瓜和黄瓜等物种的OCT基因同源性较高,分别为93%和92%;进化树分析发现,西瓜与黄瓜亲缘关系最近,而与狭刀豆亲缘关系最远.构建pET-30a-OCT原核表达载体,转化大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导和SDS-PAGE检测,表达的融合蛋白与预期蛋白大小相符合.本研究为进一步研究其酶学特性和瓜氨酸合成代谢中的作用提供技术支持.
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