呋喃西林代谢物单克隆抗体的制备及免疫学特性鉴定

为建立呋喃西林代谢物氨基脲(semicarbazide,SEM)的免疫学检测方法,采用碳化二亚胺法成功合成人工免疫抗原SEM-牛血清白蛋白(bovine serum albumen,BSA)(SEM-BSA),并用该抗原免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇介导的细胞融合技术制备SEM的单克隆抗体(SEM mAb),采用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单抗,并对其效价、敏感性、特异性和亲和力等免疫学特性进行鉴定.结果表明:成功制备SEM单克隆抗体SEM-3D9,抗体效价达到1:5×106,敏感性半抑制质量浓度为0.42?μg/L,亚型为IgG1,亲和常数Ka=2.1×108 L/mol,与呋喃唑酮代谢物2-NP-3-氨基-2-恶唑酮、呋喃它酮代谢物2-NP-5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮类似物的交叉反应率(cross reaction,CR)均小于0.01％,与呋喃妥因代谢物2-NP-1-氨基-2-乙内酰的CR为0.0168％,特异性良好.