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在清言上使用

糙皮侧耳几丁质酶基因PoChi1的克隆及表达分析

Acta Edulis Fungi(2014)

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摘要
利用反转录 PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)克隆糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)几丁质酶基因 PoChi1,将其克隆至原核表达载体,得重组质粒 pEASY-PoChi1,转化至大肠杆菌 Escherichia coli BL21(DE3);通过半定量 RT-PCR 分析该基因在糙皮侧耳不同发育阶段的表达。糙皮侧耳几丁质酶基因 PoChi1序列长度为1188 bp,编码395个氨基酸,N 端24个氨基酸为信号肽。经 IPTG 诱导后 SDS-PAGE检测,该基因编码产物的相对分子量约为29 kDa。PoChi1在糙皮侧耳成熟子实体期的表达量最高。
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关键词
prokaryotic expression,Pleurotus ostreatus,Chitinase gene,RT-PCR,expression pattern
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