目的探讨复方中药复智散（FZS）能否通过抑制细胞周期依赖性蛋白激酶5（CDK5）通路,减轻Aβ25-351诱导的新生鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化。方法选用24 h内新生Wistar大"/>
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复智散通过细胞周期依赖性蛋白激酶5通路减轻皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化

Zhao-xu ZHANG,De-sheng WANG

wf（2016）

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Abstract
目的探讨复方中药复智散（FZS）能否通过抑制细胞周期依赖性蛋白激酶5（CDK5）通路,减轻Aβ25-351诱导的新生鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化。方法选用24 h内新生Wistar大鼠,分离纯化皮层神经元,进行体外培养。皮层神经元在体外培养7 d后,应用20μmol·L-1Aβ25-351作用于皮层神经元24 h。药物治疗组则应用FZS(20 mg·L-1)、CDK5抑制剂Roscovitine(15μmol·L-1)、钙蛋白酶（calpain）制剂Calpeptin(20μmol·L-1)预处理24 h,然后用20μmol·L-1Aβ25-351作用24 h。用Western blot检测Tau蛋白Ser396、Ser202和Thr231位点磷酸化水平和CDK5的激活蛋白p25/p35的蛋白水平;荧光酶标仪测定荧光强度来反映calpain活性;免疫沉淀法检测CDK5激酶活性。结果 20μmol·L-1Aβ25-351作用于皮层神经元24 h后,Tau蛋白在Ser396、Ser202、Thr231位点磷酸化水平增加,CDK5激酶活性升高,CDK5激活蛋白p25水平升高,calpain活性升高。20 mg·L-1FZS治疗组则明显抑制了Aβ25-351导致的Tau蛋白在Ser396、Ser202、Thr231位点磷酸化水平增加,抑制了CDK5激酶活性、p25蛋白水平以及calpain活性升高。CDK5抑制剂roscovitine和calpain抑制剂calpeptin作为阳性对照药物也显示了抑制Tau蛋白过度磷酸化的作用。结论复智散可能通过calpain-p25/CDK5通路抑制Aβ25-351导致的皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化。
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Alzheimer’ s Disease,CDK5,Tau protein,Fuzhisan,calpain,p25
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