丙泊酚通过细胞外信号调节激酶信号通路上调海马星形胶质细胞脑源性神经营养因子表达和分泌

目的 检测丙泊酚对大鼠海马及其星形胶质细胞脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)表达分泌的影响,并探讨其中涉及的信号分子. 方法 按随机数字表法将24只SD大鼠分为3组(每组8只),根据丙泊酚给予后不同时间检测点分别命名为:注射丙泊酚后即刻检测组(0 min组)、注射丙泊酚后45 min检测组(45 min组)、注射丙泊酚后90 min检测组(90 min组).将丙泊酚注射液(10 g/L)以100 mg/kg腹腔注射后,用定量PCR检测大鼠海马BDNF的mRNA水平,用免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)表达.体外实验中培养的细胞分为3组:对照组(Ctrl组)、丙泊酚组(Pro组)和抑制剂PD98059+丙泊酚组(Pro-PD组).Pro-PD组先用10 μmol/L 细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)抑制剂PD98059预处理培养的原代大鼠海马星形胶质细胞2 h,随后用10 μmol/L丙泊酚继续孵育24 h.检测各组细胞凋亡及BDNF分泌情况. 结果 与0 min 组比较,45 min 组、90 min 组大鼠海马BDNF mRNA水平分别为1.20±0.05和0.86±0.04(P﹤0.05),且BDNF mRNA水平均呈时间依赖性变化,先增高,而后降低.免疫组织化学法检测显示45 min 组GFAP表达升高.体外实验显示,Ctrl组细胞存活率为(91.2±2.4)%,Pro组细胞存活率为(90.3± 3.0)%,两组差异无统计学意义(P﹥0.05).与Ctrl组比较,Pro组海马星形胶质细胞的BDNF mRNA水平为1.15±0.04 (P﹤0.05),而Pro-PD组细胞BDNF的mRNA水平为0.92±0.05(P﹥0.05),且显著低于Pro组(P﹤0.05).Pro组海马星形胶质细胞BDNF的分泌水平为(62±4)ng/L,高于Ctrl组(49±3)ng/L(P﹤0.05);而Pro-PD组细胞BDNF的浓度为(44±3)ng/L,与Ctrl组差异无统计学意义(P﹥0.05),但显著低于Pro组(P﹤0.05). 结论 丙泊酚激活海马星形胶质细胞,并通过ERK信号通路提高海马星形胶质细胞BDNF的表达和分泌.