失重对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响

目的 研究模拟失重环境对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响.方法 健康成年雄性Wistar大鼠56只,随机分为0h(正常对照)、6h、12h、1d、3d、5d、7d共7个组(n=8).采用Morey-Holton尾悬吊法建立模拟失重动物模型.各组大鼠实验结束后眼球取血,取双侧肾上腺.采用放射免疫分析法检测血浆肾上腺髓质激素[多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)]水平,RT-PCR法检测肾上腺组织酪氨酸羟化酶(TH)mRNA和miRNA-375的表达,Western blotting和免疫组化技术检测肾上腺髓质TH蛋白表达.结果 尾悬吊模拟失重条件下大鼠血浆肾上腺髓质激素波动明显,6～12h出现一过性下降,随后急剧升高,3d时形成峰值.RT-PCR结果显示,各组大鼠肾上腺组织TH mRNA表达波动明显,6h时呈现一过性下降,随即上升,1d时达峰值,之后呈下降趋势,5d时形成谷值.大鼠肾上腺髓质TH蛋白表达以尾悬吊3d时染色最强.肾上腺髓质中miRNA-375表达表现为尾悬吊早期(6h)呈一过性显著升高,随后快速下降,12h、1d和3d时表达受到明显抑制,表达量显著下降,5d时表达量增加,7d时显著升高(p＜0.05).结论 失重环境可影响大鼠肾上腺髓质激素分泌,其机制可能与miRNA-375通过复杂的信号通道调控TH表达有关.