微生物源酶制剂抗菌活性测定方法研究

目的 参考联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)食品添加荆联合专家委员会推荐的方法,在对包括纸片规格、培养基、标准菌株浓度、阳性对照物浓度等影响酶制剂抗菌活性检测主要因素优化的基础上,建立微生物源酶制剂抗菌活性检测方法.方法 以浓度为5.0和10.0 μg/片的环丙沙星纸片为阳性对照,在相同的培养温度、培养时间等试验条件下,比较9种不同规格纸片、3种品牌培养基、3个菌液稀释度对6种标准菌株抗菌活性的影响.结果 HZT 2号滤纸、2张叠加的whatman903纸片与商业化抗菌活性测定用纸片Whatman 2017-013效果相当;国产1号和2号胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)与进口TSA效果相当;确定5种受试菌培养24 h后菌液的10倍稀释液为工作浓度(化脓链球菌的工作浓度为菌液的20倍稀释液);环丙沙星纸片的工作浓度为5.0μg/片.结论 HZT 2号滤纸、2张叠加的Whatman903滤纸或Whatman 2017-013滤纸、国产或进口TSA培养基、受试微生物培养24 h的10倍(化脓链球菌20倍)菌液稀释液、环丙沙星浓度5.0μg/片为微生物源酶制剂抗菌活性测定中优化出的最佳试验条件.