利奈唑胺诱导粪肠球菌耐药50S核糖体蛋白突变位点分析

目的 阐明体外诱导利奈唑胺耐药粪肠球菌的核糖体蛋白位点变异特征.方法 收集1株血流感染的粪肠球菌利奈唑胺敏感株,通过体外浓度倍增法诱导利奈唑胺耐药;挑取单克隆,经E-test条测定MIC值,获得各菌株的耐药浓度梯度;提取耐药菌株基因组DNA,PCR扩增核糖体蛋白L3和L4(对应rplC和rplD基因),扩增产物经测序后与野生株比较,获得核糖体蛋白及对应氨基酸的突变位点.结果 经体外多步法诱导利奈唑胺耐药的不同MIC值粪肠球菌共13株.PCR测序分析2株母株均无变异位点,rpm基因对应的氨基酸位点不尽相同,rplD基因普遍存在T301C位点变异,对应的氨基酸为Phe101Leu.结论 体外多步法可诱导粪肠球菌利奈唑胺耐药,耐药机制与核糖体蛋白位点突变密切相关,但仍需进一步研究证实突变位点与耐药的关系.