干扰素调节因子5(IRF5)调控小鼠骨髓源性巨噬细胞的极化

目的 诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞,检测干扰素调节因子5(IRF5)在M1型和M2型巨噬细胞中的表达差异,并用IRF5小干扰RNA(IRF5 siRNA)沉默巨噬细胞中IRF5基因表达,观察其极化状态的改变.方法 用γ干扰素(IFN-γ)和脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1型巨噬细胞分化,白细胞介素4(IL-4)诱导其向M2型巨噬细胞分化,实时定量PCR检测IRF5、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)和巨噬细胞甘露糖受体(MMR) mRNA在M1型和M2型巨噬细胞中的表达.用IRF5 siRNA转染巨噬细胞,实时定量PCR检测M1型巨噬细胞标志物IRF5、IL-12、TNF-α、iNOS和M2型巨噬细胞标志物Arg1、MMR mRNA的表达,评估其极化状态的改变.结果 流式细胞术检测巨噬细胞分化率达81.7％,实时定量PCR检测显示M1型巨噬细胞中IRF5、IL-12、iNOSmRNA的表达量明显高于M2型巨噬细胞,TNF-α亦高于M2型巨噬细胞;M2型巨噬细胞中Arg1、MMR mRNA表达量同M1型巨噬细胞比较显著增高.IRF5 siRNA转染巨噬细胞后,IRF5、IL-12、TNF-α、iNOS mRNA的表达量显著降低,Arg1、MMRmRNA的表达量明显增加.Western blot法检测结果显示IRF5、IL-12、TNF-α、iNOS蛋白的表达量显著降低,Arg1、MMR蛋白的表达量明显增加,极化状态向M2型巨噬细胞偏移.结论 IRF5对巨噬细胞的极化调控有重要作用,可作为鉴别M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞的重要标志物.