多重PCR/反向线点杂交(RLB)检测细菌性脑膜炎病原体的研究

Experimental and Laboratory Medicine（2011）

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摘要

目的建立快速、高通量的多重PCR/反向线点杂交(RLB)的方法检测3种细菌性脑膜炎病原体__肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌.方法针对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌的特异性基因序列设计引物和相应的特异性探针,优化多重PCR/RLB检测中的引物浓度、dNTP浓度、探针的浓度等的条件.结果多重PCR/RLB检测对肺炎链球菌DNA最低检测极限可达6.2× 10-1ng/μl,对流感嗜血杆菌DNA最低检测极限可达8.5×10-8ng/μl,对脑膜炎奈瑟菌DNA最低检测极限可达8.3× 10-8ng/μl.结论多重PCR/RLB检测体系能够正确的鉴定3种细菌性脑膜炎病原体,用于临床样本的高通量筛查细菌性脑膜炎病原体,特异性好,灵敏度高.

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关键词

Bacterial Meningitis,Detection,Reverse line blot,Multiplex PCR

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