一种新的灵长类IL-4基因表达产物纯化方法

目的研究一种能保持重组蛋白活性的新的蛋白纯化方法。方法 IPTG诱导表达重组质粒pET-30a(+)-IL-4,取可溶性部分进行Ni-NTA agarose非变性方法纯化,随后逆向利用Biologic Duoflow Chromatography系统阴离子交换柱进一步分纯,并用Western Blot鉴定所得纯化蛋白。结果重组质粒pET-30a(+)-IL-4有部分可溶性表达,经Ni-NTA agarose非变性的方法纯化后仍有部分杂蛋白的存在,利用Biologic Duoflow Chromatography系统阴离子交换柱进一步分纯后得到高度纯化的重组蛋白并经Western Blot鉴定为目的蛋白。结论利用创新方法经两个纯化步骤得到了有活性的目的蛋白。