肾小球系膜细胞金属蛋白酶1组织抑制剂对血管内皮生长因子及转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨高糖(葡萄糖25 mmol/L)条件下大鼠肾小球系膜细胞（RMC）金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）对血管内皮生长因子（VEGF）及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法:用高糖培养基体外培养未转染及分别用pcDNA3空载体、人反义TIMP-1基因重组真核表达载体转染的RMC 24 h，将细胞分为未转染组、空载体组及反义组，并设正常培养条件下的RMC作为正常对照组。RT-PCR检测各组RMC TIMP-1、VEGF及TGF-β1 mRNA的表达。Western印迹检测胞质中TIMP-1、VEGF及TGF-β1蛋白的表达。免疫荧光检测各组RMC胞质中VEGF的表达。结果:高糖培养条件下未转染组及空载体组RMC 大鼠TIMP-1、VEGF及TGF-β1 mRNA表达均较对照组明显增加（P<0.01），而此两组间相应指标表达差异无统计学意义；反义组大鼠TIMP-1、VEGF mRNA表达较未转染组显著降低（P<0.01），而TGF-β1 mRNA表达则无变化。Western印迹也得到相同的结果。免疫荧光检测发现，未转染组及空载体组VEGF荧光表达较对照组显著增强，反义组荧光则较未转染组明显减弱。结论:高糖可促进RMC TIMP-1、VEGF及TGF-β1表达增加。在高糖条件下，TIMP-1可能位于VEGF上游，促进其表达；而TGF-β1表达并不受TIMP-1调控，高糖可能通过其他途径上调其表达.