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半巢式-RT-RealtimePCR检测李痘病毒

Plant Quarantine(2012)

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摘要
李痘病毒(Plumpoxvirus,PPV)是我国重要的植物检疫性有害生物。本研究根据PPV中cP基因(coatproteingene)的保守序列,设计了3条PCR引物和1条TaqMan探针,建立了半巢式-RT-ReahimePCR检测PPV的方法。该方法有机地结合了巢式PCR和实时荧光PCR技术;3条引物形成的2套PCR体系相互验证,有效提高了结果的准确性;荧光探针有效提高了检测的灵敏度。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达37fg/μL植物总RNA。
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关键词
PCR
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