NLS-RARα基因沉默对HL-60细胞增殖及分化的影响

目的探讨抑制NLS-RARα基因表达对急性早幼粒细胞白血病(Acute promyeolic leukemia,APL)细胞株HL-60增殖及分化的影响。方法将针对NLS-RARα基因的shRNA真核表达质粒(干扰组)和阴性对照质粒(阴性对照组)采用脂质体法转染HL-60细胞,并设未转染组,经G418筛选出稳定转染的细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活力;RT-PCR和QRT-PCR法检测细胞中NLS-RARα基因mRNA的转录水平;Western blot法检测细胞中NLS-RARα蛋白的表达水平;流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达及细胞周期的分布。结果与阴性对照组和未转染组比较,干扰组HL-60细胞的增殖活力、NLS-RARα基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均明显下降(P<0.05);CD11b的表达明显升高(P<0.05);G1、G2期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少(P<0.05)。结论抑制NLS-RARα基因的表达可抑制HL-60细胞增殖,促进其分化。本实验为进一步研究APL发生发展的机制及APL的分子诊断和靶向治疗新途径奠定了基础。