雷帕霉素与PD98059联合调控人结直肠癌细胞周期和mTOR信号转导通路

目的探讨雷帕霉素(RPM)与PD98059对人结直肠癌细胞的联合作用及机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测RPM和PD98059对人结直肠癌细胞的生长抑制作用,应用流式细胞术检测RPM和PD98059对细胞周期的影响,应用免疫印迹法检测RPM和PD98059对于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路相关蛋白的调控。结果RPM与PD98059对人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29均有生长抑制作用,PD98059的作用具有一定的时间-浓度依赖性。在相同作用条件下,RPM与PD98059的联合抑制效果明显优于PD98059单独用药。RPM与PD98059单独或联合用药对人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、H129的生长周期均有调控作用(P<0.01),但作用位点不同。RPM与PD98059可下调mTOR、p70s6K、4E-BP1蛋白的磷酸化水平,对SW480和HCT116细胞的总体4E-BP1蛋白水平也具有调控作用,以二者的联合作用最为显著。RPM与PD98059对SW480、HCT116、HT29细胞的mTOR和p70s6K总体水平无明显影响。结论RPM与PD98059可协同抑制人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29的生长,并阻滞其细胞周期。其作用机制可能涉及对mTOR信号转导通路相关蛋白磷酸化水平的调控。