miR-203a-5p靶向调控JAG1对多发性骨髓瘤细胞增殖、周期调控的作用及机制研究

目的:探讨miR-203a-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的生物学功能及其调控机制.方法:采用稳健排序整合方法对GEO数据库中的3个miRNA表达谱(GSE16558、GSE24371和GSE17498,包含131个MM样本和17个正常浆细胞样本)进行差异性表达整合分析.用慢病毒构建了能稳定过表达miR-203a-5p的MM细胞株.采用qRT-PCR方法检测MM细胞株RPMI8226及U266中miR-203a-5p的表达情况,并检测miR-203a-5p表达上调后对MM细胞增殖及细胞周期表型的影响.应用稳定表达miR-203a-5p的U226细胞进行裸鼠成瘤实验,评价miR-203a-5p在体内肿瘤发生中的作用.利用TargetScan和miRanda等生物预测软件预测miR-203a-5p的候选靶基因,利用荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot研究MM细胞中miR-203a-5p的潜在靶点.结果:miR-203a-5p在MM细胞系中的表达显著低于正常浆细胞.miR-203a-5p过表达可以抑制RPMI8226和U266细胞的增殖和细胞周期进展.动物体内实验表明,上调miR-203a-5p可以明显抑制体内肿瘤的生长.通过双荧光素酶报告基因实验证实了JAG1的3'UTR区域可以与miR-203a-5p结合,JAG1是miR-203a-5p的作用靶基因.此外,回复实验结果显示,过表达JAG1可以逆转由miR-203a-5p引起的细胞增殖抑制及周期阻滞.结论:miR-203a-5p通过靶向调控JAG1抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖和细胞周期进展,从而发挥抑癌作用,该分子有望作为一种基于miRNA的MM治疗靶点.