基于血小板活化功能探讨从脾论治原发性免疫性血小板减少症止血机制

目的 从血小板活化角度探索从脾论治原发性免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)的可能止血机制.方法 将120只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、强的松组、非从脾论治组、健脾益气摄血组、归脾汤组,每组各20只小鼠.除正常组外,向小鼠注射豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)建立ITP模型.在建模成功后的第8天,正常组、模型组小鼠予生理盐水0.1 ml/10 g体积灌胃,其余各组均按照0.1 ml/10 g体积灌胃给药,1次/d,持续8 d.评估出血程度、采用全自动血液分析仪检测血小板计数、ELISA检测模型小鼠血清血小板活化因子(Platelet activating factor,PAF)、钙离子(Ca2+)、蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)、血小板颗粒膜蛋白(Granule membrane protein-140,GMP-140),观察相应指标变化.结果 (1)出血程度:给药第8天各组小鼠与模型组出血程度比较,强的松组、健脾益气摄血组、归脾汤组出血程度改善,差异有统计学意义(P<0.01).(2)血小板计数:强的松组、健脾益气摄血组、归脾汤组、非从脾论治组用药前与用药第4天比较,差异无统计学意义(P>0.05),用药第8天较用药前及用药第4天血小板计数明显上升,差异有统计学意义(P<0.01).(3)血小板活化相关指标:与正常组比较,模型组小鼠PAF、Ca2+、PKC表达均降低,GMP-140表达稍升高.与模型组比较,除非从脾论治组外(P>0.05),其他干预组PAF、Ca2+、PKC、GMP-140表达均升高(P<0.05,P<0.01).与非从脾论治组比较,健脾益气摄血组在升高PAF、PKC水平有一定优势,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);归脾汤组在升高PAF、Ca2+水平有一定优势,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).GMP-140中药干预组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 从脾论治方能有效降低出血程度、提高ITP模型小鼠外周血小板计数,升高PAF及血小板内Ca2+水平,激活PKC,促进血小板上GMP-140表达.调节血小板活化功能可能是从脾论治ITP的有效止血机制之一.