二陈汤加味通过HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路对COPD大鼠细支气管炎症的影响

目的:观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠细支气管中高迁移率族蛋白1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)通路中关键分子表达的影响,探讨二陈汤加味通过HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路对COPD细支气管炎症的作用及分子机制.方法:60只SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5、10、20g·kg-1)和丙酮酸乙酯(EP)组(HMGB1抑制剂),每组10只.以烟熏联合气管滴注脂多糖的方法制备COPD大鼠模型.二陈汤加味各干预组灌胃(ig)给药,并腹腔注射林格溶液4mL;EP组ig等体积生理盐水,并腹腔注射EP(0.04g·kg-1);正常组和模型组等体积生理盐水ig、并等体积林格溶液腹腔注射,连续干预21 d.酶联免疫吸附测定法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中HMGB1、趋化因子CXCL1和CXCL2、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中HMGB1、RAGE和NF-κB p65 mRNA表达,免疫组化(IHC)检测细支气管组织中HMGB1、RAGE、磷酸化(p)-κBp65和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组用力肺活量(FVC)、第1秒末时间肺活量(FEV1)和FEV1/FVC均显著降低(P＜0.01);BALF中HMGB1、CXCL1、CXCL2和MCP-1的含量均显著升高(P＜0.01);肺组织 HMGB1、RAGE、NF-κB p65 mRNA表达显著增加(P＜0.01);HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65 和 α-SMA蛋白表达明显增强(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量组FEV1/FVC均明显提高(P＜0.05,P＜0.01);BALF中HMGB1、CXCL1、CXCL2 和 MCP-1 含量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);HMGB1、RAGE、NF-κB p65 mRNA 表达明显减少(P＜0.05,P＜0.01);HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65和α-SMA蛋白表达均明显减弱(P＜0.05,P＜0.01).结论:二陈汤加味能有效对抗COPD细支气管炎症反应.其机制可能与通过下调HMGB1、RAGEmRNA表达,抑制NF-κB活化,减少HMGB1、CXCL1、CXCL2和MCP-1的释放,从而抑制细支气管炎症损伤及异常修复有关.