新型鸭呼肠孤病毒动物感染模型的建立

为了建立新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)动物感染模型,本研究利用NDRV代表株SD19/6201,分别以105.0ELD50/0.1mL(低剂量)和106.0ELD50/0.1mL(高剂量)感染14日龄、21日龄SPF麻鸭,分别于感染后第5d、第7d迫杀雏鸭,观察脾脏剖检变化并统计其病变率.结果显示,14日龄雏鸭低剂量感染组在感染后第5 d脾脏病变以出血点/斑为主,病变率为70％(7/10),感染后第7 d脾脏上述病变更加明显,病变率为80％(8/10);高剂量感染组雏鸭剖检脾脏病变比低剂量感染组明显,出现黄白色坏死灶,感染后第5 d、第7 d脾脏病变比率分别为100％(10/10)和90％(9/10).21日龄低剂量感染组雏鸭感染后第5d、第7d脾脏出血或坏死的比率明显低于相同剂量的14日龄雏鸭感染组,脾脏病变率分别为60％(6/10)和40％(4/10),高剂量感染组雏鸭感染后第5 d、第7 d脾脏出现出血、坏死的比率均为80％(8/10).14日龄和21日龄雏鸭感染后第5 d不同剂量感染组脾脏指数均明显高于对照组,感染后第7 d各感染组雏鸭脾脏肿大程度有所恢复,脾脏指数与对照组差异不明显,但脾脏坏死症状并未恢复.脾脏病理变化结果显示,与14日龄雏鸭感染组相比,21日龄雏鸭感染组脾脏组织病理变化程度更轻,与剖检病变基本一致.采用TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测各组雏鸭脾脏病毒载量,结果显示,感染后第5d即可在各感染组雏鸭脾脏中检测到大量的病毒,且14日龄雏鸭感染组脾脏病毒载量高于21日龄雏鸭感染组,各日龄感染雏鸭高剂量感染组脾脏病毒载量均高于低剂量感染组.以上结果表明,NDRV对14日龄雏鸭最佳感染剂量是105.0ELD50/0.1 mL,NDRV对21日龄雏鸭最佳感染剂量是106.0 ELD50/0.1 mL,最佳剖检时间为感染后第7d.本研究首次建立了 NDRV动物感染模型,为该病毒后期疫苗质量标准的研究提供了重要依据.