四逆散对抑郁大鼠BDNF/TrkB,5-HT/5-HTlAR及HPA轴的影响

目的:观察四逆散对抑郁大鼠脑神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB),5-羟色胺(5-HT)/5-HT1A受体(5-HT1AR)及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响,探讨四逆散基于BDNF/TrKB,5-HT/5-HT1AR及HPA轴的抗抑郁作用机制.方法:120只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、四逆散低、中、高剂量组和氟西汀组,每组20只.除正常组外,其余5组连续21d采用孤养结合慢性温和不可预知性刺激法(CUMS)制备抑郁大鼠模型.四逆散低、中、高剂量组分别灌胃(ig)四逆散(1.25,2.5,5)g·kg-1,氟西汀组ig盐酸氟西汀0.01 g·kg-1,正常组和模型组ig等体积生理盐水,每日1次,持续干预21d.干预期间,各造模组大鼠均继续给予刺激.通过糖水偏好和旷场实验评估CUMS模型大鼠抑郁状态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质酮(CORT)及海马匀浆中BDNF,5-HT水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马TrKB,5-HTlAR,糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马TrKB,5-HT1AR,GR,MR蛋白表达水平;苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织形态学变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠糖水偏好率显著下降(P＜0.01),旷场实验中水平得分和垂直得分显著降低(P＜0.01),血浆CRH,ACTH,CORT含量显著升高(P＜0.01),海马BDNF,5-HT含量显著降低(P＜0.01),海马TrKB,5-HT1AR和GR mRNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),MR mRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),HE染色结果显示海马神经元结构损伤.与模型组比较,四逆散低、中、高剂量组和氟西汀组糖水偏好率显著升高(P＜0.01),旷场实验中水平得分和垂直得分明显升高(P＜0.05,P＜0.01),血浆CRH,ACTH,CORT含量明显降低(P＜0.05,P＜0.01),海马BDNF,5-HT含量明显升高(P＜0.05,P＜0.01),海马TrKB,5-HT1AR和GR mRNA及蛋白表达水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),MR mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),HE染色结果显示海马神经元结构明显复原.结论:四逆散具有显著的抗抑郁作用,其机制可能与升高大鼠海马BDNF,5-HT含量,上调TrKB,5-HT1AR和GR mRNA及蛋白表达水平,下调MR mRNA及蛋白表达水平,抑制HPA轴亢进,增强海马组织神经元的再生和修复相关.