低温对小鼠N2a细胞氧糖剥夺/复氧复糖时内质网-线粒体结构偶联的影响

目的:评价低温对小鼠N2a细胞氧糖剥夺/复氧复糖时内质网-线粒体结构偶联(MAMs)的影响。方法:将生长状态良好的小鼠N2a细胞采用随机数字表法分为5组( n＝24)：对照组(C组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、低温组(H组)、siRNA-Mfn2转染＋低温组(siMfn2＋H组)和siRNA-NC转染＋低温组(siNC＋H组)。C组在正常条件下培养；OGD/R组氧糖剥夺3 h后复氧复糖24 h；H组氧糖剥夺3 h后，在32 ℃低温下复氧复糖24 h；siMfn2＋H组和siNC＋H组模型制备前48 h时分别转染siRNA-Mfn2及非特异性siRNA，余同H组。于复氧复糖24 h时，采用CCK-8法检测细胞存活率，qRT-PCR法检测Mfn2 mRNA表达水平，Western blot检测Mfn2表达水平，透射电镜下观察并测量内质网-线粒体偶联部分长度、内质网周长和线粒体周长，计算内质网-线粒体偶联部分长度/内质网周长比值和内质网-线粒体偶联部分长度/线粒体周长比值，反映MAMs水平。 结果:与C组比较，其余4组细胞存活率、Mfn2及其mRNA表达水平和MAMs水平降低( P<0.05)；与OGD/R组比较，H组和siNC＋H组细胞存活率、Mfn2及其mRNA表达水平和MAMs水平升高( P<0.05)，siMfn2＋H组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与H组比较，siMfn2＋H组细胞存活率、Mfn2及其mRNA表达水平和MAMs水平降低( P<0.05)，siNC＋H组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:低温减轻小鼠N2a细胞氧糖剥夺/复氧复糖损伤的机制与上调Mfn2表达，从而稳定MAMs有关。