稳定表达E-cadherin的TW2R细胞增强人胚胎干细胞生长

Chinese Journal of Comparative Medicine(2021)

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摘要
目的 构建一种可高效支持人胚胎干细胞生长的人源饲养层细胞系.方法 首先通过在TW2R细胞系稳定表达人E-钙黏素(E-cadherin)基因构建永生化人源饲养层细胞系TWE3R,并比较人胚胎干细胞在TWE3R及其亲本细胞上的克隆形成数.将H9人胚胎干细胞在TWE3R细胞上经过10代连续传代培养后,进行人胚胎干细胞特异性标志物分析、拟胚体形成分析和畸胎瘤形成检测等实验.结果 本研究成功构建了永生化的人源饲养层细胞系TWE3R,TWE3R细胞可比其亲本细胞更高效地支持人胚胎干细胞生长,并且TWE3R饲养层细胞还具有支持低密度接种条件下(每平方厘米5个)人胚胎干细胞生长的特性.此外,H9人胚胎干细胞在TWE3R细胞上长期传代培养后,仍可保持所有人胚胎干细胞的未分化特性、正常细胞核型以及在体内外均可分化形成所有3个胚层衍生物的潜能.结论 本研究所建立的永生化人源饲养层细胞系TWE3R具有高效支持胚胎干细胞生长的特性.
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