千喜片含量测定及其对DSS诱导溃疡性结肠炎的作用研究

目的 建立千喜片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的高效液相(HPLC)含量测定方法及千喜片对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)的作用研究.方法 采用Agilent C1s(250 mm ×4.6μm,5μm)液相色谱柱,流动相为乙腈-0.5％磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;进样量5μl;柱温为30℃;建立3％葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型,实验分为空白对照组,模型组,阳性对照组,千喜片低(150mg/kg)、中(300mg/kg)、高剂量组(600mg/kg).观察小鼠给药前后的体征及疾病活动指数、结肠组织病理学评分、检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量变化.结果 穿心莲内酯在0.0608～0.76 μg(r=0.9993)范围内、脱水穿心莲内酯在0.1602～2.00μg(r =0.9999)范围内线性关系良好.经测定,平均每片千喜片中含有穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯之和为2.76mg.千喜片给药600mg/kg后,可以明显降低小鼠结肠炎症状,给药组小鼠血清中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-o含量较模型组显著降低(P＜0.01).结肠病理显示与模型组对比千喜片给药后结肠组织中炎性细胞减少,隐窝与杯状细胞增多.HAI评分结果显示,与模型组比较,千喜片给药后HAI评分显著降低(P＜0.01).结论 建立了不同于药典的千喜片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的检测方法,结果均高于《中国药典》要求.千喜片可以显著改善UC小鼠结肠炎病理损伤,并可下调促炎因子的表达并上调抑炎因子的水平.提示千喜片对UC小鼠的治疗作用与调节炎症因子的平衡密切相关.