PTPN14对乳腺癌细胞增殖能力的影响

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶14 (PTPN14)对乳腺癌细胞增殖能力的影响.方法 首先在乳腺癌细胞株MCF-7中建立稳定高表达PTPN14的细胞系,并通过RT-PCR和蛋白免疫印迹实验进行鉴定;然后通过RNA干扰技术靶向抑制蛋白表达,采用细胞计数法、噻唑蓝(MTT)法、细胞克隆形成实验、BrdU细胞掺入实验以及裸鼠体外成瘤实验,检测PTPN14对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖的影响.结果 通过在mRNA和蛋白水平的检测,证实高表达PT-PN14的MCF-7稳定细胞系建立成功.MTT法结果表明,培养第5天时高表达PTPN14组的MCF-7细胞数约为对照组的60％ (P＜0.05);细胞计数实验表明,与对照组比较,高表达PTPN14的MCF-7细胞数在培养第3、4、5天时明显减少(P＜0.05);细胞克隆形成实验中,对照组和高表达PTPN14组的克隆数分别为(125±25)个和(62±13)个,差异具有统计学意义(P＜0.05);同时,低表达内源性PTPN14将明显促进细胞增殖.进一步的裸鼠体内成瘤实验中,高表达PTPN14组的肿瘤体积仅为对照组的1/5 (P＜0.05);对照组和PTPN14组的肿瘤重量分别为:(0.6±0.2)g和(0.2±0.1)g,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 高表达PTPN14抑制乳腺癌细胞的增殖能力.