FSH对牦牛卵母细胞EGF、EGFR表达及其细胞凋亡的影响

旨在研究促卵泡素(FSH)对牦牛卵母细胞体外成熟,以及对表皮生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)的表达影响和与细胞凋亡的关系.在牦牛卵母细胞体外成熟培养液中添加不同浓度FSH(终浓度分别为0、2、5、10 μg·mL-1),体外成熟培养后,运用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)和免疫荧光染色技术检测EGF、EGFR表达情况,采用qRT-RCR和蛋白免疫印迹法检测Bax、Bcl-2表达变化.结果表明:1)成熟培养液中加入FSH可提高COCs成熟率,当成熟液中FSH为5μg·mL-1时,成熟率最高,达到76.84％,显著高于其他组(P＜0.05);2)随着FSH浓度的增加,EGF和EGFR表达逐渐升高,其中在5μg·mL 1 FSH组中,EGF和EGFR的表达最高,显著高于其他组(P＜0.05),而在10 μg·mL-1FSH组中,EGF和EGFR的表达水平降低;EGF主要位于卵丘细胞中,而EGFR在卵丘细胞和卵母细胞均有表达;3)随着FSH浓度的增加,Bax和Bcl-2的表达显示出明显的逆向模式,Bax的表达水平逐渐降低,Bcl-2的表达水平逐渐升高,在5μg·mL-1 FSH组中Bax的表达量最低,Bcl-2的表达量最高,而在10 μg·mL-1FSH组中,Bax的表达水平升高.综上表明,在牦牛卵母细胞体外成熟过程中,FSH提高了卵母细胞发育能力,诱导EGF和EGFR表达,而且可能通过调控Bax、Bcl-2等凋亡相关因子的表达,抑制卵母细胞凋亡.