Hg2+人工免疫原的制备及免疫特性鉴定

为了建立重金属汞离子(Hg2+)免疫学检测方法,试验采用异硫氰酯法将双功能螯合剂ITCBE与Hg2+螯合形成半抗原,然后将其与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(0VA)耦联合成人工免疫原Hg2+-ITCBE-BSA和包被原Hg2+-ITCBE-OVA,用紫外扫描分析(UV)、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用Hg2+-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法测定多克隆抗体(pAb)效价,阻断ELISA法鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性.结果表明:免疫原Hg2+-ITCBE-BSA和包被原Hg2+-ITCBE-OVA制备成功,Hg2+-ITCBE-BSA中BSA和Hg2+的含量分别为9.09 g/L和45.88 mg/L;间接ELISA法检测效价达到1∶1.024×105,阻断ELISA法检测Hg-EDTA的IC50为45.49 g/L.说明Hg2人工免疫原制备成功.