牛骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的制备及其特性鉴定

制备牛骨骼肌肌钙蛋白T的单克隆抗体,评价单抗的特性.肌肉提取物经聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后切胶,用于免疫Balb/c小鼠.经聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)法融合,制备稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法对单抗的效价、亚型、特异性等进行分析.经筛选后,获得2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,其中3A8特异性好、效价高,为IgG1亚型,亲和常数为8.1×108 L/mol.免疫印迹结果显示该单抗能与牛羊的骨骼肌提取物反应,不与鸡鸭的骨骼肌提取物反应.