脱氧雪腐镰刀菌烯醇间接竞争酶联免疫吸附测定试剂盒的研制及初步应用

HAN Li,ZHANG Wenju,WANG Ziliang,LI Yuetao,JIANG Jinqing,LI Renfeng,FAN Guoying,ZHANG Haitang,NIU Linlin,LYU Junmei,ZHOU Ye

Chinese Journal Of Animal Nutrition（2019）

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摘要

本试验旨在研制一种自主组装的间接竞争酶联免疫吸附测定（icELISA）试剂盒,用于饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的检测。在制备抗DON单克隆抗体的基础上,建立icELISA标准曲线,并对其检测方法进行优化,然后用于测定试剂盒各项性能,将测定结果与高效液相色谱（HPLC）法测定结果进行比较分析。结果显示:本试验研制的icELISA试剂盒对DON的最低检测浓度为1. 147 ng/mL,检测范围为1. 50～130. 31 ng/mL,半抑制浓度（IC50）为9.84 ng/mL。对小麦、玉米、猪料、鸡料4个样品进行添加回收试验,回收率在77.1%～113.2%,相对标准偏差（RSD）在4.2%～12.6%。并且,该试剂盒具有特异性高、稳定性良好、有效使用寿命长且样品基质干扰可以忽略不计等优点。利用该试剂盒测定20个盲样,其测定结果与HPLC法测定结果一致性良好。上述结果说明本试验研制的DON icELISA试剂盒各项性能符合相关技术要求,对DON检测具有准确可靠、方便快捷、高通量大等特点,可满足市场对DON的快速初筛需求。

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关键词

icELISA kit,deoxynivalenol,preliminary application,performance measurement

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