洛铂诱导胆管癌RBE细胞凋亡及其对B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3/半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-8和细胞色素C凋亡相关因子影响

目的 观察洛铂对胆管癌RBE细胞抗肿瘤作用及B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、actived-半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8和细胞色素C(Cyt-C)转录及表达的影响.方法 不同浓度洛铂干预胆管癌RBE细胞一定时间,噻唑蓝(MTT)比色法检测RBE细胞的生长抑制,流式细胞法检测细胞周期,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)双染检测凋亡率,Western blot及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测bax、bcl-2、actived-Caspase-3、Caspase-8、Cyt-C蛋白及mRNA表达的变化.结果 MTT结果显示随浓度升高及时间延长,药物对细胞增殖抑制作用增强(P＜0.05),24 h的半数抑制剂量(IC50)值为11.82 mg/L.随药物浓度增加G0/G1期与G2/M期细胞增加,S期细胞比例减少(P＜0.05).Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)/PI检测显示洛铂能诱导RBE细胞凋亡,与对照组比较有更高的凋亡率(Pp＜0.05).Western blot及Real-time PCR检测结果显示bax、actived-Caspase-3、Caspase-8和胞质内Cyt-C转录和表达升高,bcl-2转录水平降低.结论 洛铂对胆管癌RBE细胞的增殖具有明显的抑制作用,其可能通过增加bax、抑制bcl-2的转录和表达,释放Cyt-C激活Caspase-8、Caspase-3诱导RBE细胞凋亡.