无淋巴结转移结肠癌微小核糖核酸表达谱的初步研究

目的:探讨无淋巴结转移结肠癌微小核糖核酸(microRNA)表达谱,筛选与结肠癌早期发生、发展相关的特异性microRNA.方法:选取手术、病理证实未发生淋巴结转移的结肠癌及大于癌旁5 cm结肠组织标本各3例,抽提分离miRNA,与Agilent microRNA基因芯片杂交,并进行图像和数据分析.运用microRNA特异引物对差异表达的microRNA进行荧光定量实时聚合酶链反应(RT-RCR)验证.结果:筛选出在结肠癌中差异表达的microRNA有14个,其中12个microRNA表达水平增高,分别为miR-106b、miR-135b、miR-18a、miR-18b、miR-196b、miR-19a,miR-224、miR-335、miR-424、miR-20a*、miR-301b和miR-374a;2个microRNA表达水平降低,分别为miR-378和miR-378*.miR-106b和miR-19a下游存住符合要求的靶基凶数目众多.检测了芯片中显示表达上凋的miR-18a和miR-135b在3例结肠癌组织和癌旁组织中的表达,结果显示miR-18a和miR-135b在3例痛组织和癌旁组织中表达均上调;荧光定量RT-PCR结果与microRNA芯片的结果符合.结论:miR-106b、miR-135b、miR-18a、miR-18b、miR-196b等microRNA在结肠癌与癌旁组织中存在差异表达,预测其下游靶基因中大部分与肿瘤相关,提示它们可能在结肠癌早期发生、发展讨程审起着重要的调控作用.