高尔基体蛋白73定量检测方法的建立

目的 建立人血清中高尔基体蛋白73(GP73)的定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法.方法 辣根过氧化物酶标记GP73单抗,优化各类反应液的工作浓度和各种反应条件,建立双抗体夹心的ELISA检测方法；同时评价所建立方法的灵敏度、线性范围、特异性、稳定性等性能指标.结果 所建立方法的灵敏度为18.5 ng/ml,线性范围为25～ 500 ng/ml,批内、批间变异均＜10％.检测GP73临床高、中、低值血清回收率为分别为95.3％、92.6％和103.7％；在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察,线性相关系数均＞0.98,标准偏差＜10％.结论 成功建立了定量检测血清中GP73的方法,该方法能够满足临床检测的需求.