大蒜素对尼古丁致人牙周膜成纤维细胞氧化毒性的保护作用

目的研究大蒜素对尼古丁所致人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs)氧化毒性的保护作用。方法 1)建立尼古丁对HPDLCs氧化毒性的模型,采用水溶性四氮唑(WST)比色法选出可有效抑制HPDLCs存活率的尼古丁质量浓度X,用于后续实验。2)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组(大蒜素质量浓度分别为15、30、60μg·mL-1),以不同培养液培养24 h后,采用WST比色法选出可显著改善HPDLCs存活率的大蒜素质量浓度Y用于后续实验。3)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组,分别于培养1、4、8、12、24 h后测量细胞内谷胱甘肽(GSH)浓度。结果 0.8 mg·mL-1尼古丁即可显著抑制HPDLCs存活率(细胞存活率为空白组的77%,P<0.05,取X为0.8 mg.mL-1);而60μg·mL-1大蒜素可显著改善此负性作用,将细胞存活率提升至尼古丁组的112%(P<0.05),且与空白组比较无统计学差异(P>0.05),取Y为60μg·mL-1。在培养后的各时间点,尼古丁+大蒜素组GSH浓度与空白组相比均无统计学差异(P>0.05),但较尼古丁组均有明显提高(P<0.05);培养8 h时,尼古丁+大蒜素组GSH浓度与尼古丁组相比差异最大,前者较后者提高82%。结论 60μg·mL-1大蒜素可以显著降低尼古丁对HPDLCs的氧化损伤作用。