兔血管内皮祖细胞的体外获取

目的探讨如何获得高浓度的兔血管内皮祖细胞(EPC)。方法抽取兔双下肢骨髓,应用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞,进行体外培养、传代,应用细胞生长因子VEGF和bFGF联合诱导培养传代细胞,观察诱导前和诱导后第2代、3代细胞形态的变化,并对培养所得的细胞进行免疫细胞化学染色,观测CD34、CD133、CD31表达水平的变化。结果培养细胞第2d出现簇状贴壁生长,第4d由圆形变成纺锤形,呈条索状排列。与诱导前相比,诱导后第2代细胞CD34、CD133和CD31阳性细胞率无明显变化,诱导后第3代细胞CD34细胞阳性率无明显改变,CD133细胞阳性率明显下降,CD31细胞阳性率明显升高(P均<0.05)。结论兔骨髓源的单个核细胞可以在体外分离培养,诱导所得细胞具有EPC的特性。